Ditemukan pada usia 10 tahun ketika ia dan saudara laki-lakinya mengikuti audisi profesional dan tanpa sengaja tersandung di tangga yang menyebabkan hidungnya patah, Eliza Dushku yang berdarah setengah Albania dan setengah Denmark menapaki jalan menuju ketenaran dengan berperan sebagai ratu drama. Lahir pada 30 Desember 1980 di Boston, Massachusetts. Sebagai anak bungsu dari tiga bersaudara, ia menghabiskan masa kecilnya dalam keluarga Mormon dengan orang tua yang keduanya adalah profesor. Kakak laki-lakinya, Nate, adalah seorang aktor dan model. Orang tuanya bercerai sebelum ia lahir.
Sejak masa mudanya, ia menyukai kegiatan seperti bisbol dan hoki es. Ia belajar drum, biola, dan tari, serta menjadi artis tetap di Teater Anak-Anak Watertown. Ia bersekolah di Sekolah Menengah Atas Watertown. Ia berencana untuk melanjutkan kelas bahasa Inggrisnya di Sekolah Suffolk, tetapi ketenaran merenggutnya.
Permintaan yang meluas menyebabkan ia mendapatkan peran indoxxi dalam film That Night. Ia terpilih di antara banyak kandidat lain pada usia 10 tahun. Peran itu membuka pintu baginya karena ia berakting bersama Robert Delaware Niro dan Leonardo di Caprio dalam That Boy's Life. Ia mendapatkan berbagai peran lain seperti Correct Lies, Bye Bye, Love, dan Race the Sun. Tidak hanya itu, ia juga muncul di acara televisi dan film pendek.
Setelah istirahat beberapa tahun, Eliza muncul sebagai Faith yang cantik dan licik dalam serial Warner Bros. Buffy the Vampire Slayer yang dibintangi oleh Sarah Michelle Gellar yang juga cantik dan seksi. Perannya awalnya ditulis untuk lima episode, tetapi ia bertahan di seluruh musim ketiga dan mengulangi perannya dalam episode dua bagian di musim keempat. Faith kembali sebagai pahlawan wanita di Angel bersama Brian Boreanaz. Sebagai aktris yang hebat dalam peran sosiopat, ia menjadi simbol bagi beberapa penjahat.